納米材料因其獨特的物理化學性質，在生物技術領域展現出巨大的應用潛力。其中，靜電紡絲技術制備的納米纖維膜，以其高比表面積、可調控的孔隙結構和良好的生物相容性，成為固定化酶的理想載體。本研究聚焦于將殼聚糖與聚乙烯醇共混，通過靜電紡絲技術制備復合納米纖維膜，并探討其作為載體固定β-半乳糖苷酶的性能與機制。

殼聚糖是一種天然多糖，具有良好的生物相容性、可生物降解性和豐富的氨基活性位點，易于與酶分子通過吸附或共價結合。聚乙烯醇則是一種水溶性合成高分子，成纖性好，能有效改善純殼聚糖溶液的電紡性能。將兩者共混，可以結合二者的優勢，制備出形貌均勻、力學性能穩定且富含活性官能團的復合納米纖維。

實驗首先優化了殼聚糖/聚乙烯醇的共混比例、溶液濃度及電紡工藝參數（如電壓、接收距離、流速等），以獲得直徑均勻、表面光滑、無串珠結構的納米纖維膜。掃描電子顯微鏡表征證實了成功制備出纖維直徑在100-300納米范圍的網狀結構。

將β-半乳糖苷酶通過物理吸附法或戊二醛交聯的共價結合法固定在制備的納米纖維膜上。研究比較了不同固定化方法對酶負載量、活性回收率及操作穩定性的影響。結果表明，共價固定法雖然初始活性回收率略低于吸附法，但其酶泄漏率顯著降低，在重復使用和長期儲存中表現出更優越的穩定性。固定化后的β-半乳糖苷酶最適溫度和pH范圍相較于游離酶有所拓寬，熱穩定性也明顯增強。

進一步的研究評估了該固定化酶在乳糖水解中的應用性能。在批次反應中，固定化酶在多次循環使用后仍能保持較高的催化活性。將固定化酶膜組裝成流動反應器進行連續操作，也展現出穩定的催化效率和良好的操作耐久性，證明了其在食品工業（如生產低乳糖牛奶）或生物傳感領域實際應用的可行性。

殼聚糖/聚乙烯醇電紡納米纖維是一種高效、穩定的酶固定化載體。該研究不僅為β-半乳糖苷酶的固定化提供了性能優異的新材料，也為其他工業酶的固定化及基于納米纖維的生物催化劑設計提供了有價值的參考。未來工作可進一步探索纖維表面的功能化修飾，以更精準地調控酶與載體間的相互作用，提升固定化酶的綜合性能。